SPE固相萃取技術(shù)4（固相萃取儀器裝置）

在什么項(xiàng)目的前處理適合使用固相萃取技術(shù)，即用固相萃取會(huì)比普通的溶劑萃取更理想，個(gè)人認(rèn)為有以下幾種情況：

（一）  水中有機(jī)物的前處理。

此類常規(guī)處理基本上是用與水不相溶的有機(jī)溶劑振蕩萃取，用固相萃取的優(yōu)勢(shì)在于

（1）可以定量地重復(fù)前處理過程。

 溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時(shí)間的程度，卻無(wú)法控制振蕩頻率，強(qiáng)度，動(dòng)作，我們知道，每個(gè)人的振蕩動(dòng)作是不同的，就是同一個(gè)人，也很難保證始終劃一的動(dòng)作。所以說，溶液萃取的動(dòng)作是不定量，不能重復(fù)的。

 而在應(yīng)用固相萃取時(shí)，比較容易保持過柱和洗脫速度的均一和穩(wěn)定，因此，固相萃取的萃取過程是可以重復(fù)，可定量的。

（2）現(xiàn)場(chǎng)處理。

水中有機(jī)物的分析有一個(gè)長(zhǎng)期困擾我們的瓶頸。即有機(jī)物在池塘水庫(kù)等環(huán)境中能保持相對(duì)穩(wěn)定，但是一旦進(jìn)入采樣瓶這個(gè)小環(huán)境中，就會(huì)迅速發(fā)生變化，所以很多水的有機(jī)物分析方法要求即采即分析，zui多不能超過4  個(gè)小時(shí)，可一般的情況是，從取水回到實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間就遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止4  小時(shí)了，樣品發(fā)生了變化，分析結(jié)果的可靠性可想而知。

如果引入固相萃取技術(shù)，由于其設(shè)備簡(jiǎn)單，體積小，易于攜帶，*可以做到在現(xiàn)場(chǎng)一邊采樣，一邊進(jìn)行前處理。采樣者帶回實(shí)驗(yàn)室的是固相萃取柱，而不是水樣。這樣就能保證我們處理的是真正成份穩(wěn)定的水樣。

從實(shí)際應(yīng)用來(lái)說，在水的檢測(cè)中用固相萃取技術(shù)取代傳統(tǒng)液液萃取還有相當(dāng)?shù)墓ぷ餍枰?，目前尚不?取代，但是其發(fā)展的前景很值得看好。

SPE固相萃取技術(shù)4（固相萃取儀器裝置）（3）有機(jī)試劑消耗量的減少。

在處理水樣時(shí)，如果用固相萃取，則只需要在洗脫時(shí)用到有機(jī)溶劑，用量比傳統(tǒng)液液萃取要少數(shù)十倍以上。對(duì)于實(shí)驗(yàn)者的人身保護(hù)和環(huán)境保護(hù)有著積極的意義。

二）批量生物材料的藥物成分萃取

這是固相萃取在實(shí)際應(yīng)用中比較成功的范例，主要是指在醫(yī)院中檢測(cè)樣和尿樣時(shí)的前處理工作，由于對(duì)藥物成份的吸附是固相萃取的優(yōu)勢(shì)，加上樣品單一，組成固定，在確定方法后很適合大規(guī)模批量的凈化操作。

三）免疫親和固相萃取。

萃取的理想狀態(tài)就是特異性富集或特異性排斥，可是不論是溶液萃取還是固相萃取，基本上是相似相溶的，zui多做到“某一類"層次上的萃取，而無(wú)法達(dá)到“某一種"層次的萃取。

在固相萃取柱的基礎(chǔ)上加上免疫親和技術(shù)，可以利用其生物特異性選擇吸附，能夠達(dá)到近于理論的萃取。

實(shí)際困難在于雖然其概念很好，但是由于技術(shù)難度相對(duì)較高，可供應(yīng)用的更少。

SPE固相萃取技術(shù)4（固相萃取儀器裝置）

三、固相萃取的應(yīng)用局限性

（1）樣品局限性

固相萃取不適于處理固體樣品。對(duì)于固體，必須將其先制備為液體形態(tài)才能進(jìn)行固相萃取操作，這一點(diǎn)就遠(yuǎn)不如液體萃取了。

即使是液體樣品，固相萃取也有其額外的苛刻要求，即液體必須潔凈度高，不能有懸浮物或其它固體顆粒，否則會(huì)在柱前形成堵塞，無(wú)法繼續(xù)過柱及洗脫操作。所以固體樣品要制備成液體，液體樣品還要過濾。相比來(lái)說，溶劑萃取就不存在這個(gè)麻煩，稍臟點(diǎn)也影響不大。

（2）結(jié)構(gòu)局限性

 固相萃取柱的結(jié)構(gòu)很簡(jiǎn)單，除了塑料管，只有篩板和填料了。就這簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)，帶來(lái)了便利，也帶來(lái)了與生俱來(lái)的矛盾，一些我們?cè)谟萌軇┹腿r(shí)永遠(yuǎn)不會(huì)遇到的矛盾。

矛盾1    液面的問題。

當(dāng)我們進(jìn)行活化、凈化，洗脫等典型的固相萃取操作時(shí)，會(huì)使用不同溶劑，這時(shí)的操作要求在液面下降到篩板時(shí)換加不同溶劑，加得太晚，會(huì)使填料中干涸產(chǎn)生氣泡，影響結(jié)果的穩(wěn)定性（甚至?xí)驗(yàn)槿芤旱膹埩栴}而使液面無(wú)法下降）。相反，如果加得太晚，會(huì)使加入溶液和在篩板上的原有溶液混合，產(chǎn)生一個(gè)其實(shí)是我們不希望存在的、無(wú)法預(yù)料極性的新洗脫液，使結(jié)果的可靠性大打折扣。

加液加到篩板，說得容易做起來(lái)難，如果單獨(dú)做一個(gè)樣品可以緊盯液面操作。但是在批量操作時(shí)只會(huì)顧此失彼，固相萃取技術(shù)實(shí)用的一個(gè)重要意義就在于，其可以方便可靠地批量處理樣品，如果這個(gè)意義削弱的話，其實(shí)用性也就大大降低。

液面問題是制約固相萃取應(yīng)用成功的主要瓶頸，雖隱蔽卻無(wú)法回避。

SPE固相萃取技術(shù)4（固相萃取儀器裝置）解決的方法有兩種。

*種解決方法是干脆不用理會(huì)液面的困擾 ，每次都做到抽空溶液，這種做法倒是不會(huì)產(chǎn)生篩板上的溶液混合的問題，但是又會(huì)出現(xiàn)一個(gè)新的問題，即填料看起來(lái)是抽干了，但實(shí)際表面還是有數(shù)量不定的液體，每次干涸程度不一致，也無(wú)法重復(fù)。

另一種解決方法就是在使用固相萃取器時(shí)用電導(dǎo)探針測(cè)試，這個(gè)方法比較，但是也有一個(gè)新的問題，探針需要一個(gè)清洗過程，否則會(huì)有交叉污染的可能，而且有這類裝置的固相萃取器價(jià)格一般相當(dāng)?shù)匕嘿F。且一個(gè)探針在同一時(shí)間只能探測(cè)一個(gè)樣品管，要同時(shí)監(jiān)測(cè)一批小柱則很困難。

矛盾2    填料的裝填松緊問題。

用液體萃取時(shí)我們從來(lái)不用考慮整個(gè)溶劑的密度是否均勻，但是對(duì)于固體填料，我們卻不能忽略這個(gè)問題。在同一批次甚至同一包里的幾個(gè)小柱，加上相同溶液時(shí)，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)液體過柱的速度是不均勻的  ，總是有快有慢。

由于生產(chǎn)工藝和成本的綜合考慮，固相萃取小柱不可能采用類似填充液相色譜柱的勻漿高壓法，所以填料的裝填松緊不均勻是必然的。這就造成一個(gè)問題，由于液體流過的速度不一樣，在每次加液的時(shí)間也會(huì)不一樣，不利于同步批次處理樣品。而且回收率也會(huì)不同?？催^一些公司的所謂全自動(dòng)固相萃取器，其原理都有一個(gè)假設(shè)，即每根小柱的流過速度應(yīng)該一致，可惜，這真的是假設(shè)――“假"的“設(shè)"想。

矛盾3    填料的質(zhì)量穩(wěn)定問題

在我們開啟一瓶二氯甲烷或丙酮時(shí)，只要買的不是偽劣產(chǎn)品，就是不同公司的也可以放心使用，因?yàn)樗鼈兊妮腿⌒阅苁欠€(wěn)定可靠的。而固相萃取則不同，就是同一公司的填料，每次的產(chǎn)品性質(zhì)還是有些許差異，不同公司的相差更大。而如果換一家公司的固相萃取柱或同一公司不同批次的小柱，都需要我們把所有的項(xiàng)目做一遍質(zhì)量評(píng)估，那估計(jì)也沒有太多人愿意使用。

矛盾4    不能加熱

一般的加熱行為可以改善吸附作用，可是由于固相萃取柱的套管是由塑料制造的，一加熱就會(huì)變形，所以只能做常溫操作。

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